biceps-spb.ru

Инновационный проект biceps-spb.ru

Метки: Shrna, shrna это.

Малые РНК, образующие шпильки, или короткие РНК, образующие шпильки (англ. shRNA, short hairpin RNA, small hairpin RNA) — молекулы коротких рибонуклеиновых кислот, образующие во вторичной структуре плотные шпильки. ShRNA могут быть использованы для выключения экспрессии генов путем РНК-интерференции. Короткие РНК, образующие шпильки, вводят в клетки при помощи вектора, использующего промотор U6, для обеспечения конститутивной экспрессии. Такой вектор, как правило, передается дочерним клеткам и обеспечивает наследуемое выключения гена.[1]

Структура малых РНК, образующих шпильки, разрезается клеточными ферментами в малые интерферирующие РНК (siRNA), которые далее переходят в РНК-индуцируемый комплекс выключения гена (RISC). Этот комплекс связывается и разрезает мРНК, участки которых комплементарны siRNA.

Малые РНК, образующие шпильки, транскрибируются РНК полимеразой III. Образование shRNA в клетках млекопитающих иногда вызывает интерфероновый ответ, для защиты клетки, как в случае вирусной атаки. Такие процессы не наблюдаются в случае miRNA (микроРНК), которые транскрибируются РНК полимеразой II.[2]

Малые РНК, образующие шпильки, также используются и у растений. но в таком случае, не используют промотор U6. В растениях обычно используют традиционный промотор, обеспечивающий конститутивную экспрессию, — CaMV35S из вируса мозаики цветной капусты (англ. cauliflower mosaic virus 35S promoter).[3]

Примечания

  1. Short hairpin RNAs (shRNAs) induce sequence-specific silencing in mammalian cells». Genes Dev. 16 (8): 948–58. 10.1101/gad.981002. PMID 11959843.
  2. DNA constructs designed to produce short hairpin, interfering RNAs in transgenic mice sometimes show early lethality and an interferon response». J. Appl. Genet. 46 (2): 217–25. PMID 15876690.
  3. Design and cloning strategies for constructing shRNA expression vectors». BMC Biotechnol. 6: 1. 10.1186/1472-6750-6-1. PMID 16396676.


Tags: Shrna, shrna это.